A Vencel-téren lévő monumentális múzeum főépületének neoreneszánsz homlokzatát apárizsi Louvre mintájára tervezte Josef Schultz. 1818-ban alapították, és 1885-1891 között épült. A múzeum bombatámadást kapott a II. világháború idején, és megsérült 1945-ben, 1968-ban, szovjet géppuskatűz miatt, és 1972-ben, és 1978-ban is a prágai metró építésének idején. Ez a Cseh Köztársaság legnagyobb, és legrégebbi múzeuma. Többmillió elemes gyűjteményében régészeti, és természettudományos leletek, ásványok (Európa legnagyobb ásványgyűjteménye), érmék, és egyebek találhatók. Egymillió kötetes könyvtár, és a cseh panteon is itt található. A múzeum lapidáriumában a Károly-híd eredeti szobrait, ill. sérült, vagy olyan műalkotásokat őriznek, amelyek a jövőben az időjárás viszontagságai miatt elpusztultak volna.

Eljutás: Metró: A, és C vonal: Muzeum állomás. 11-es villamos: Múzeum megálló.

Belépőjegy (2010): 150 czk. 6-15 éveseknek, és 60 év feletti nyugdíjasoknak: 100 czk.

Nyitva tartás: Minden nap: 10:00-18:00. Minden hónap első szerdáján: 10:00-20:00. Minden hónap első keddjén zárva.